论文题目:Establishment
and application of quantitative detection of Bacillus velezensis HMB26553, a
biocontrol agent against cotton damping-off caused by Rhizoctonia防治棉花立枯病生防菌贝莱斯芽胞杆菌HMB26553定量检测方法的建立与应用
发表期刊:Biotechnology
Journal
作者:苏振贺、刘高歌(并列1作),马平(通讯作者)
作者所在部门:植物病害生物防治研究室
内容简介:
本研究构建了一种高灵敏度的定量Taqman
PCR方法,用于检测和定量棉花根际的贝莱斯芽胞杆菌HMB26553,并探究了该菌株在棉花根际的定殖状况与其防治效果之间的关联。研究首先对菌株HMB26553进行基因组测序,获取其全基因组序列。通过在NCBI进行高通量比对,在稳定遗传的质粒plaBV2上鉴定出特异序列pB-gene0026。基于此序列,设计了特异性引物与TaqMan探针。同时,以管家基因gyrB为基础设计内参引物和TaqMan探针,确定菌株HMB26553中plaBV2的拷贝数为2。与传统平板计数法相比,基于上述引物和探针建立的检测技术,展现出高特异性与高灵敏度,检测限可达1.5个拷贝基因组。利用该方法,研究发现经菌株HMB26553浸种和灌根处理后,其在棉花根际的定殖数量与棉花立枯病防治效果之间存在相关性。综上,本研究建立的方法,为菌株HMB26553的合理应用提供了科学依据。